AAV感染肠道的常见注射方式包括肠系膜上动脉（superior mesenteric artery, SMA）注射、灌肠、尾静脉注射和腹腔注射等。这些方式各有优劣。尾静脉注射和腹腔注射作为系统性给药的手段，操作简便且对动物的损伤较小，但它们需要的注射量较大，且特异性不强。相较之下，灌肠的转导效率有限，更容易导致结肠的感染。而SMA注射虽具较高的转导效率，主要感染小肠和结肠，但其手术难度增加，对动物的损伤也相对较大。

在之前的操作指南系列中，我们已经介绍了尾静脉注射和腹腔注射的具体步骤。本期内容将重点分享灌肠递送与SMA注射的操作。

灌肠递送

1. 小鼠禁食12小时后，用异氟醚进行麻醉。
2. 将软导管从小鼠的肛门插入约4厘米，通过导管缓慢注入病毒液体，注射完成后及时拔出导管。
3. 将小鼠保持悬倒状态60秒以上，以确保液体在结肠中的均匀分布。
4. 待小鼠复苏后，可以恢复正常的饮水和进食。

SMA注射

1. 固定麻醉后的小鼠于右侧卧位，持续给予异氟烷。
2. 剃除小鼠左侧腋线肋下区域的毛发，暴露皮肤并进行消毒处理。
3. 在左侧脾脏区域沿腋线和侧腹部的皮肤上做一个1-2厘米的切口，切开腹外斜肌，利用微型牵开器拉开皮肤和腹壁，移开小肠并用温生理盐水浸湿的纱布覆盖，以暴露SMA。
4. 在20倍显微镜下分离SMA与腹膜后组织，并在近端用小结扎带固定注射针，同时用微血管夹暂时切断腹主动脉的血供。
5. 使用33号半寸针头连接注射器轻轻插入SMA，缓慢注入病毒液体，用结扎带轻轻扎紧血管以防止注射部位渗漏。手术显微镜应全程观察注射过程以确保准确性。
6. 注射后立即拔针，缝合SMA注射部位，移除结扎带和微血管夹恢复小肠血流，使用无菌棉签轻轻按压注射部位以止血。
7. 在腹腔内注射1毫升无菌温生理盐水后，对小鼠进行缝合。
8. 术后每15分钟对动物进行一次监测，直到小鼠稳定保持俯卧姿态；随后每天监测两次，直至能放回笼中。

本文描述的SMA注射操作来自于Stacy L. Porvasnik等人的研究（Microsurgery, 2010）。通过合理选择注射方式，配合尊龙凯时(中国区)人生就是搏的品牌理念，致力于推动生物医疗领域的不断发展与创新。